青娱乐91-日日撸夜夜撸-国产激情网站-九九操-av免费观看网址-欧美综合一区二区-日韩免费在线播放-国产精品综合网-久久久人人人-色七七视频-精品国产av一区二区-亚洲天堂社区-久久久久久久久亚洲-成人男女视频-神马午夜888

歡迎來到武漢普諾賽生命科技有限公司網站!
咨詢熱線

400-999-2100

當前位置:首頁  >  技術文章  >  細胞學堂 | RAW 264.7誘導極化及鑒定大全

細胞學堂 | RAW 264.7誘導極化及鑒定大全

更新時間:2023-02-03  |  點擊率:4864

RAW 264.7(小鼠單核巨噬細胞白血病細胞)是破骨細胞、炎癥研究最-常用的體外模型之一,被廣泛用于研究風濕性關節炎、骨質疏松癥、骨質溶解、牙周炎等骨骼疾病。


極化方式


巨噬細胞是具有異質性的一類免疫細胞,在體內外不同環境影響下可極化為不同表型參與機體生理、病理反應。從激活方式上分為經典激活的巨噬細胞M1選擇性激活的巨噬細胞M2


1

M1型分化

細菌和脂多糖(LPS)可以誘導巨噬細胞向M1型分化,產生促炎細胞因子,抵抗病原入侵,但也會造成機體損傷,在實驗中可采用2.5ng/mL IFN-γ和200ng/mL LPS共同作用12小時誘導其極化


640.png

圖1. a.RAW 264.7 未分化形態圖 b.RAW 264.7 M1型分化形態圖




2

M2型分化

白細胞介素(IL-4)可以誘導巨噬細胞向M2型分化,分泌抗炎細胞因子,并在組織修復與重建和腫瘤的形成過程中發揮作用,在實驗中可采用10ng/mL IL-4作用12小時誘導其極化


圖2. RAW 264.7 不同分型形態圖



鑒定方法


M1、M2具有各自特征性標志分子,iNOS、CD86、TNF-α是常見的M1型巨噬細胞的標志分子,IL-10、Arg-1、CD206是常見的M2型巨噬細胞標志分子。一般在實驗研究中:

1

WB可以分析RAW264.7細胞iNOS、YM-1和Arg-1的表達水平(如圖3);


圖3. WB分析照射對IL-4誘導的RAW264.7細胞YM-1和Arg-1的表達影響

2

流式細胞術(FCM)可以分析RAW264.7細胞表面CD86和CD206的表達(如圖4);


640 (2).png

圖4. 流式細胞術分析照射對IL-4誘導的小鼠RAW264.7細胞CD206和CD209的表達

3

實時定量 PCR 和 ELISA 可以分析IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-12 及 IL-10 等細胞因子的表達及分泌(如圖5);


640 (3).png

圖5. 用于實時熒光定量PCR的引物序列

4

Griess reagent 可以分析細胞培養上清 NO 生成(如圖6)。


圖6. 不同樣品對RAW 264.7中NO產生的影響


參考文獻


[1] 羅進芳, 朱瑞麗, 易浪,等. 青藤堿對LPS、IL-4誘導的小鼠RAW264.7巨噬細胞極化的影響[J]. 中國免疫學雜志, 2015, 31(1):5.

[2] 陳濤, 梁瀟, 賀明,等. RAW264.7細胞M1/M2亞型的誘導和鑒定[J]. 中國分子心臟病學雜志, 2011(2):4.

[3] 解海榮, 李貞, 李海亮 ,等. 不同照射方式對IL-4誘導的小鼠RAW264.7細胞極化的影響. 中國輻射衛生, 2017, 26(6): 637-641.

[4] Li C, Du Y, Lv H, et al. Injectable Amphipathic Artesunate Prodrug-Hydrogel Microsphere as Gene/Drug Nano-Microplex for Rheumatoid Arthritis Therapy[J]. Adv. Funct. Mater. 2022, 32, 2206261.

[5]  Li P ,  Hao Z ,  Wu J , et al. Comparative Proteomic Analysis of Polarized Human THP-1 and Mouse RAW264.7 Macrophages[J]. Frontiers in Immunology, 2021, 12:700009.

[6] Ji-Eun Lee, Jae Hoon Lee, Byungrok Min,et al. Immunostimulatory effect of egg yolk phosvitin phosphopeptides produced by high-temperature and mild-pressure pretreatment and enzyme combinations in RAW 264.7 cells via TLR2/MAPK signaling pathway[J].Journal of Functional Foods,Volume 98,2022,105264.



主站蜘蛛池模板: 亚洲精品国产精品乱码视色 | 麻豆视频免费 | 蜜臀中文字幕 | 久久久免费精品 | 久久久久久久久久久久久久免费看 | 欧美一区二区三区精品 | 精品一区二区三区中文字幕 | 国产精品久久久免费观看 | 国产日韩91 | 日韩资源站 | 亚洲国产图片 | 蜜桃成人无码区免费视频网站 | 麻豆成人免费视频 | 久久久久成人精品无码 | 久久久久久影院 | 视频一区二区免费 | 毛片内射 | 天天干视频在线观看 | 精品人妻无码专区在线 | 橹图极品美女无圣光 | 性高跟鞋xxxxhd人妖 | 国产精品福利导航 | 国产成人在线免费观看 | 日批视频免费在线观看 | 成人福利视频 | 天天操天天拍 | 日本色区| 国产成人av在线播放 | 高h在线观看 | 亚洲精品国产无码 | 亚洲一页| 麻豆成人免费 | 婷婷色激情| 中文字幕亚洲欧美 | 欧美精品动漫 | 中国性猛交 | 欧美美女性生活视频 | 麻豆激情视频 | 肉丝美脚视频一区二区 | 午夜理伦三级理论 | 欧美一及片 | 在线一区 | 全黄一级男人和女人 | 久久一卡二卡 | 精品国产aⅴ一区二区三区四川人 | 国产三级av片 | 日本黄色不卡视频 | 成人性生交大片免费看 | 日韩午夜在线 | 亚洲欧洲精品一区二区 | 欧美天天射 | 97视频播放 | 草久av | 日本精品在线观看 | 国产一级淫 | 日本大尺度做爰呻吟舌吻 | 久久精品国产亚洲AV无码男同 | 国产毛片毛片毛片毛片毛片毛片 | 永久免费精品视频 | 操丝袜少妇| 亚洲偷自| 在线国产一区 | 亚洲香蕉久久 | 中文无码精品一区二区三区 | 一区二区不卡在线 | 久久精品2019中文字幕 | www日本视频 | 手机在线观看毛片 | 欧美视频在线观看一区二区 | 激情免费av | 中文字幕在线观看二区 | 久久综合婷婷国产二区高清 | 欧美一区二区国产 | 又黄又免费的网站 | 中文字幕人妻一区二 | 亚洲激情黄色 | 男男在线观看 | 午夜影院免费在线观看 | 一级片中文字幕 | 日韩激情综合 | 欧美伊人网| 国产高清一二三区 | 亚洲一二三区视频 | 国产精久久久 | 免费高清毛片 | 日本精品免费视频 | 午夜婷婷| 黄色片一区 | 91免费视频大全 | 亚洲熟妇av日韩熟妇在线 | 三浦理惠子av在线播放 | 爱射网| 佐佐木明希电影 | 日本女教师电影 | 欧美日韩一区二区三区视频 | 天堂在线资源网 | 国产午夜精品一区二区三区嫩草 | 亚洲区av| 偷拍欧美另类 |