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換季細胞培養“步步為營”:從操作到消毒的7個關鍵步驟

更新時間:2025-05-09  |  點擊率:599

季節交替,尤其是在春夏之交或梅雨季來臨前后,實驗室內環境的溫度與濕度往往會發生劇烈變化。這種變化不僅影響培養的穩定性與細胞生長狀態,也顯著提高了微生物污染的發生概率。常見污染包括細菌、真菌、支原體及“黑膠蟲",它們可能通過空氣、耗材甚至水源進入培養系統,對實驗數據的準確性與細胞模型的可靠性構成嚴重威脅。



為保證換季期間細胞培養的穩定與高效,科研人員應從污染類型與來源入手,構建系統性的防污染思維體系,并在日常工作中建立“預防為主、清潔為要、應對有方"的三重防線。本期細胞學堂將為您解密常見污染類型和應對污染的“換季防污染三步法",助您攻克換季細胞污染難題!

 

01# 污染類型及成因解析

 

細菌污染

典型表現

細菌污染時培養基常變得混濁發黃、pH變化并偶爾伴隨異味出現,顯微鏡下可見大量活動的球形或桿狀顆粒,常聚集于細胞周圍或器皿底部。

常見來源

常見污染源包括空氣中粉塵、操作者手部或衣物纖維脫落,以及操作過程中的不規范行為如開蓋時間過長或耗材接觸污染表面。

危害特點

細菌生長迅速,能迅速消耗培養基的營養成分、改變酸堿度并分泌毒素,導致細胞應激甚至大面積死亡,嚴重干擾實驗進度和結果。

 

真菌污染

典型表現

真菌污染時培養器皿中常出現菌絲狀或絮狀菌落,分布于液面或容器邊緣,擴散迅速且易被誤判。

常見來源

真菌孢子主要來自長期未清潔的培養箱水盤、空調系統或高濕度環境下的墻面與地面,也可通過口罩、衣物或未處理樣本進行傳播。

危害特點

真菌孢子抗性強且對常規酒精與抗生素無效,一旦污染擴散往往會報廢整組培養體系,造成嚴重損失。

 

支原體污染

典型表現

支原體污染時培養基外觀正常,但細胞增殖減緩、貼壁性下降且形態異常,常規倒置顯微鏡下通常難以直接觀察到。

常見來源

主要來源包括被污染的細胞株、操作者口腔飛沫以及未經徹-底滅菌的試劑或器材。

危害特點

支原體因體積極小難以過濾和檢測,能長期存在于細胞周圍,嚴重干擾細胞功能及科研數據的準確性。

 

“黑膠蟲"污染

典型表現

“黑膠蟲"污染時細胞周圍和培養基中有較多黑點和碎片,培養基不渾濁,但隨著培養時間延長,黑點和碎片會逐漸增多。

常見來源

多來自開放容器暴露于不潔空氣、水源或操作表面,亦可能通過外購細胞株間接引入。

危害特點

“黑膠蟲"會與細胞競爭營養,導致細胞狀態迅速惡化乃至大規模死亡。

 

02# 換季防污染三步法:


Step 1 提升防護等級,阻斷污染入侵性

定期在細胞培養基中添加抗生素,是有效降低微生物污染風險的關鍵措施,尤其在氣溫升高、濕度增大、空氣含塵量較高的換季時段尤為重要。推薦使用普諾賽®抗生素系列產品,涵蓋廣譜與專一型抗菌方案,日常防護可選擇經典的“雙抗"組合;而在真菌污染高發季節,則建議額外使用含抗真菌成分的“三抗"組合。針對支原體與黑膠蟲的日常預防,建議使用普諾賽®專門研發的清除試劑或清除培養基,確保為細胞培養提供穩定而全面的保護。


Step 2 環境清潔消毒,切斷外源污染源

實驗環境是外源污染的主要通道,需定期對細胞房、培養箱、工作臺等區域進行清潔與消毒,污染高發期可適當提高清潔頻率。推薦使用普諾賽®細胞房安全衛士,廣譜殺菌、安全無刺激,適合定期使用以維護表面無菌環境。

此外,水源污染同樣不可忽視。水浴鍋和培養箱水盤里面的水若未定期更換,極易成為污染溫床。建議每周更換水源并添加普諾賽®水浴鍋安全衛士,以實現7-10天長效抑菌,阻斷水體中潛在污染路徑。


Step 3 快速響應機制,果斷處理污染

一旦發現污染跡象,如培養液渾濁、pH變化異常或細胞形態突變等,應立即停止使用相關培養體系,并將污染源隔離。如果細胞尚處于污染初期且具有較高科研價值,可嘗試使用針對性抗生素進行救治;若污染情況不可控,應果斷棄用并處理污染細胞。同時,對受影響區域進行徹-底清潔與消毒,必要時更換耗材與培養液,避免污染蔓延擴散。并同步回溯污染路徑,全面檢查水源、空氣、人員操作及物料環節,及時整改,快速恢復實驗環境的無菌狀態。


換季期間的污染防控,不僅是細胞培養的關鍵挑戰,更是科研穩定推進的重要保障。污染防不勝防,但可以“防患于未然"——從培養基添加、環境清潔、水源管理到污染應對,每一步都不可松懈。普諾賽®致力于為科研人員提供全面、高效的細胞培養防污染解決方案,陪伴您在科研路上步步為營、穩健前行。


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以上是關于換季期間的細胞污染防控指南的詳解。更多細胞培養干貨,請持續關注細胞學堂專欄~




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