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0.25%胰酶溶液(EDTA+酚紅) 細(xì)胞傳代實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化配置指南

更新時(shí)間:2025-05-14  |  點(diǎn)擊率:2065

胰蛋白酶(Trypsin)是一種絲氨酸水解酶,它能把多肽鏈中賴氨酸和精氨酸殘基中的羧基側(cè)切段,水解細(xì)胞間的蛋白質(zhì),破壞細(xì)胞間的連接,從而使組織或貼壁細(xì)胞離散成單個(gè)細(xì)胞。胰酶分散細(xì)胞的活性與組織或細(xì)胞的特性、胰酶濃度、溫度和作用時(shí)間有關(guān),在pH 8.0和37℃時(shí),胰酶的作用能力最-強(qiáng),因此使用胰酶時(shí),應(yīng)把握好濃度、溫度和時(shí)間,以免消化過度造成細(xì)胞損傷。

一般常用胰酶的工作濃度為0.25%,而半貼壁細(xì)胞或?qū)σ让该舾械募?xì)胞常采用低濃度(0.05%)的胰酶進(jìn)行細(xì)胞消化。由于EDTA能夠螯合Ca2+和Mg2+,從而破壞細(xì)胞連接促進(jìn)細(xì)胞的解離,因此在胰酶溶液中常常會(huì)加入一定量的EDTA混合使用,以增強(qiáng)解離效果。

0.25%胰蛋白酶溶液(含EDTA、酚紅,溶于PBS)信息

形態(tài)

液體

規(guī)格

100mL

溶劑

10 mM PBS

胰蛋白酶濃度

2.5 g/L

EDTA•2Na

0.2 g/L

酚紅指示劑

10 mg/L

儲(chǔ)存條件

-5~-20℃

運(yùn)輸條件

低溫

有效期

12個(gè)月

0.25%胰蛋白酶溶液(含EDTA、酚紅,溶于PBS)注意事項(xiàng)

1、由于不同的組織或者細(xì)胞對胰酶的作用反應(yīng)不一樣,因此操作人員應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況,確定最佳消化時(shí)間;消化細(xì)胞時(shí)間不宜過長,否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁和生長狀況;

2、使用0.25%胰蛋白酶溶液(含EDTA、酚紅,溶于PBS)時(shí)應(yīng)注意無菌操作,避免污染;

3、不宜長時(shí)間放置于室溫環(huán)境或2-8℃長期保存;

4、2-8℃中解凍,搖勻后使用,切忌反復(fù)凍融,用量較少時(shí)建議分裝凍存。

5、本產(chǎn)品僅用于科研或進(jìn)一步研究使用,不用于診斷和治療。

6、0.25%胰蛋白酶溶液(含EDTA、酚紅,溶于PBS)中含有酚紅,由于是磷酸鹽緩沖體系,在冷凍后會(huì)變成淺黃色。同時(shí)該產(chǎn)品采用干冰運(yùn)輸,因此在運(yùn)輸過程中包裝內(nèi)會(huì)有部分二氧化碳累積,這些二氧化碳可能會(huì)進(jìn)入到溶液中導(dǎo)致pH略微下降。該種淺黃色的胰酶溶解后依然會(huì)變成橙紅色液體可以正常使用,或者也可以采用無菌的2 M氫氧-化鈉溶液對PH進(jìn)行微調(diào)后使用。

0.25%胰蛋白酶溶液(含EDTA、酚紅,溶于PBS)文獻(xiàn)列表

  • Near-infrared light-responsive nanocomposite hydrogels loaded with epidermal growth factor for diabetic wound healing (2025-02-14)

    期刊:Materials Today Bio

    DOI:10.1016/j.mtbio.2025.101578

    影響因子 :8.7

    引用產(chǎn)品: MEM 培養(yǎng)基 ,  特級(jí)胎牛血清 ,  青霉素-鏈霉素溶液(雙抗),100× ,  0.25%胰蛋白酶溶液(含EDTA,溶于PBS)

  • Phytic acid extraction from rice bran with acetic acid: Optimization, antioxidant capacity and mechanism based on cellular metabolomics (2025-01-22)

    期刊:LWT-FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY

    DOI:10.1016/j.lwt.2025.117394

    影響因子 :6.0

    引用產(chǎn)品: Hep G2 細(xì)胞 ,  DMEM高糖 培養(yǎng)基 ,  0.25%胰蛋白酶溶液(含EDTA,溶于PBS) ,  青霉素-鏈霉素溶液(雙抗),100×

0.25%胰蛋白酶溶液(含EDTA、酚紅,溶于PBS)常見問題解答

Q:胰蛋白酶溶液在4度大概能放多久?

A:通常我們建議胰蛋白酶放置在4℃冰箱內(nèi)一周內(nèi)使用完畢為宜,如果您的使用量較少,可以將胰蛋白酶混勻后按需進(jìn)行分裝,用不完的放在-5~-20℃冰箱長期保存。


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