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  • 2023

    12-28
    直播答疑 | 細胞培養答疑專場

    12月14日的直播中,普諾賽直播間為大家介紹了細胞黑點、細胞狀態變形、細胞空泡、聚團、脫落等常見問題,直播回放請至B站-“普諾賽生物”進行觀看。本期直播答疑,從直播間提問中,篩選出部分有代表性的問題,做了詳細解答。如有其他問題,也歡迎大家在公眾號留言,我們將在線解答。消化時間過長會損傷細胞嗎?消化時間過長會導致細胞膜蛋白的改變,最直觀的表現就是消化后第二天漂浮細胞很多或者貼壁慢。胰酶消化不掉的,二次消化對細胞損傷小還是機械吹打對細胞損傷小?建議二次消化。細胞與細胞間的連接沒有...

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  • 2023

    12-26
    細胞學堂 | A-498細胞知識盤點

    A-498(人腎癌細胞)細胞由Aaronson·S建立,是從一名52歲女性腎癌患者的腎組織中分離出的具有上皮形態的細胞系。該細胞系是一種合適的轉染宿主,在腫瘤研究中具有一定的應用價值,常作為腎細胞癌研究的模型。本期細胞學堂為大家整理了A-498細胞的培養條件與傳代、凍存步驟及常見應用,幫助您快速上手開展實驗。細胞形態A498細胞貼壁生長,呈上皮樣形態,細胞鋪開面積大,單位面積細胞總數量少,少量細胞有觸角;低密度時可觀察到單個細胞清晰的邊緣,密度大于100%時邊緣不清晰,細胞與...

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  • 2023

    12-19
    細胞學堂 | 實驗室細胞計數指南

    細胞計數是實驗室中常見的一項操作,用于確定樣品中細胞的數量,判斷細胞數量是否滿足實驗需求。本期細胞學堂為大家整理了幾種常見的計數方法:人工手動計數法、自動細胞計數儀法,以及懸浮細胞和貼壁細胞在不同密度下的鏡下視野的參考范圍,幫助您快速上手開展實驗。1人工手動計數法即通過肉眼觀察顯微鏡視野中的細胞數量,從而進行統計。操作步驟1將計數板及蓋玻片擦拭干凈,并將蓋玻片蓋在計數板上;2輕輕吹打細胞懸液,使細胞均勻分布;吸出10μL-20μL左右的細胞懸液滴在蓋片邊緣,使細胞懸液充滿蓋玻...

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  • 2023

    11-28
    直播答疑 | 懸浮細胞培養要點解析

    11月16日,普諾賽直播間為大家介紹了懸浮細胞的生長特點、培養注意事項,并通過THP-1、NK-92、NCI-H209三個細胞案例,深入講解了懸浮細胞的培養要點。直播回放可移步至B站-“普諾賽生物”進行觀看。本期直播答疑,從直播間提問中,篩選出部分有代表性的問題,做了詳細解答。如有其他問題,也歡迎大家在推文底部留言,我們將在線解答。Q1傳代時,細胞密度比較低,但是培養基又變黃了,怎么辦?細胞培養過程中,如發現細胞量較少,但培養基變黃較快,可以從以下3個方面進行排查:?檢查培養...

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  • 2023

    11-28
    細胞學堂 | 培養B16系列細胞必看知識點

    B16系列細胞屬于小鼠黑色素瘤細胞系,是源自C57小鼠的一種皮膚癌細胞,常用于腫瘤生物學研究。本期細胞學堂為大家整理了B16系列細胞的培養方法與注意事項,B16細胞黑色素的形成原因及解決方法,幫助您快速上手開展實驗。01B16系列細胞培養方法培養條件RPMI-1640(PM150110)+10%FBS(164210-50)+1%P/S(PB180120);生長特性貼壁生長,生長迅速,能產生黑色素;傳代方式0.25%含EDTA的胰蛋白酶消化2-3min,推薦傳代比例1:3-1:...

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  • 2023

    11-20
    培養基成分的稱取、分裝及保存!

    培養基成分的稱取:培養基的各種成分必須**稱取并要注意防止錯亂,*好一次完成,不要中斷。可將配方置于傍側,每稱完一種成分即在配方面軍做出記號,并將所需稱取的藥品一次取齊,置于左側,每種稱取完畢后,即移放于右側。稱取完畢后,還應進行一次檢查。培養基的分裝:培養基的分裝,應按使用的目的和要求,分裝于試管、燒瓶等適當容器內。分裝量不得超過容器裝盛量的2/3。容器口可用墊有防濕紙的棉塞封堵,其外還須用防水紙包扎(現試管一般多有用螺旋蓋者)。分裝時*好能使用半自動或電動的定量分裝器。分...

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  • 2023

    11-14
    細胞學堂 | 手把手教你培養SV-HUC-1

    SV-HUC-1(人輸尿管上皮永生化細胞),是由猿猴空泡病毒40轉染至1名11歲男孩的泌尿道上皮細胞,而建立起來的永生化細胞系。其分化特性與正常細胞相似,培養簡單,可無限傳代,卻不屬于腫瘤細胞[1]。基礎信息?生長培養基:Ham'sF-12K+10%FBS+1%P/S?生長特性:貼壁,上皮細胞樣?推薦傳代比例:1:2-1:4?推薦換液頻率:2~3次/周?培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%溫度:37℃?凍存條件:55%基礎培養基+40%FBS+5%DMSOSV-HUC-...

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  • 2023

    11-14
    直播答疑 | 原代細胞培養常見問題及解決方案

    原代培養是指由體內取出組織或細胞進行的首-次培養,也叫初代培養,是細胞系建立的第一步。在9月22日開播的“原代細胞常見問題解決方案”課程中,有很多老師就原代細胞培養問題提出了疑問。我們篩選出部分代表性問題,并作了詳細解答。臍靜脈內皮細胞需要包被嗎?選用什么包被比較好?臍靜脈內皮細胞建議包被,建議選用0.1%明膠包被,包被的細胞形態會比不包被的好看。角質細胞需要包被嗎?角質細胞生長類似上皮細胞,營養環境要求高,建議使用膠原蛋白包被。細胞原皿狀態很好,傳代后細胞邊界不清楚是什么原...

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